自動(dòng)生化分析儀的光學(xué)測(cè)定原理解析。若把某兩種顏色的光按照一定的比例混合，能夠得到白色光的話，則這兩種顏 色的光就叫做互補(bǔ)色。

1. 由于有色物質(zhì)對(duì)光的吸收具有選擇性，因此，在進(jìn)行比 色測(cè)定時(shí)，只能用光波中能被有色溶液吸收的那部分光 線，即應(yīng)該用單色光進(jìn)行比色測(cè)定。

2. 至于不被有色溶液吸收的光線。則應(yīng)設(shè)法在未透過(guò)有色 溶液之前或之后將其消除掉。 

3. 濾光片就起這個(gè)作用。根據(jù)前面所敘述的理由可知，選 擇濾光片的原則應(yīng)是:濾光片的顏色應(yīng)與待測(cè)溶液的顏色 為互補(bǔ)色。

朗伯-比爾定律 當(dāng)一束平行單色光照射到均勻、非散射的溶液時(shí)， 光的一部分被吸收，一部分透過(guò)溶液，一部分被比色皿 的表面所反射。設(shè)入射光的強(qiáng)度為Io，吸收光的強(qiáng)度Ia ，反射光的強(qiáng)度為Ir，透過(guò)光的強(qiáng)度為It。則它們之間 有如下關(guān)系: Io= Ia + Ir + It 

在實(shí)際比色分析時(shí)，所用的比色皿都是同質(zhì)料、同 規(guī)格的，因此反射光的強(qiáng)度為一定值，不會(huì)引起誤差， 即反射光的影響可以不加考慮。這樣，上式可簡(jiǎn)化為: I o= I a + I t 當(dāng)入射光的強(qiáng)度一定時(shí)，被吸收的光的強(qiáng)度越大， 透過(guò)光的強(qiáng)度就越小。這就是說(shuō)，光的減弱僅僅與有色 溶液對(duì)光的吸收有關(guān)。 溶液的濃度越大、透過(guò)的液層越厚、入射的光線越 強(qiáng)，則對(duì)光線的吸收越多。

如果入射光的強(qiáng)度不變，則光的吸收僅與液層厚度 及溶液的濃度有關(guān)。它們之間的關(guān)系可以用下式表示: A＝K×C×L 1.式中，A為吸光度；K為吸(消)光系數(shù)；C為溶液的濃度 ；L為液層厚度。 2.此公式說(shuō)明：在入射光一定時(shí)，溶液的吸光度與溶液的 濃度及液層厚度成正比。 3.此式就是光的吸收定律的數(shù)學(xué)表達(dá)式，又稱朗伯－比爾 定律。這一定律是比色分析和其他吸收光譜分析的理論 基礎(chǔ)。

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